Тест для онаружения ВПЧ высокого риска в условиях ограниченных ресурсов careHPV Test

Функциональные свойства

Многоцентровое клиническое исследование с применением теста СareHPV Test с системой тестирования careHPV проводилось с использованием образцов из цервикального канала, отобранных с помощью щетки careBrush и среды для сбора careHPV, женщин (30-59 лет) в общей скрининговой популяции и в амбулаторных клиниках. Всего в исследовании участвовали 1279 женщин с относительно одинаковым распределением по 3 больницам; 1241 участницапрошли исследование до конца. В 3 исследовательских центрах отборали образцы примерно у 147 пациенток с диагностированным раком шейки матки или с предраковыми поражениями (дисплазия шейки матки степениCIN 2/3+), 162 пациенток с доброкачественными поражениями(воспаление/ дисплазия шейки матки легкой степени, CIN 1) и 932 здоровых контрольных участниц.

Для визуальной оценки (VIA) также производилось окрашивание уксусной кислотой. В каждой больнице проводилось жидкостное цитологическое исследование, а результаты записывались с применением классификации Бетесда. С образцами всех пациентов проводили тест careHPV, тест digene HC2 на выявление ДНК ВПЧ высокого риска и амплификация нуклеиновых кислот ВПЧ с применением набора для определения посредством ПЦР и флуоресценции. Все анализы с применением тестов careHPV Test проводились при комнатной температуре (15–30°C). Производилось сравнение результатов с течением заболевания у каждого пациента. Соответствие между результатами тестов careHPV Test и digene HC2 на ДНК ВПЧ высокого риска составило 93,71%. Соответствие между результатами тестов careHPV Test и определения ВПЧ методом ПЦР составляло 90,89%.

В сравнительных исследованиях с применением самостоятельно собранных образцов и образцов, взятых врачом, результаты анализов методом careHPV указывали на пониженную, но сопоставимую чувствительность для CIN 2+: 70–83% при самостоятельном заборе образцов в сравнении с 82–96% при заборе образцов врачом. Результаты анализа специфичности в отношении CIIN 2+ были одинаковыми при применении обоих методов: 87-91% при самостоятельном заборе образцов в сравнении с 83-92% при заборе образцов врачом.

Исследования указывают на то, что тест careHPV Test не вступает в перекрестную реакцию с микроорганизмами, с большой вероятностью встречающимися в мазках из шейки матки или влагалища. Тест careHPV Test не вступает в перекрестную реакцию с геномной ДНК человека. Накладывающихся и перекрестно реагирующих цепей ДНК в ВИЧ, ВГВ, ВГЕ, ЦМВ, аденовирусе 2 и Neisseria meningitides нет. Вещества, которые могут присутствовать в образцах из шейки матки или влагалища (цельная кровь, смывы, противогрибковый крем, гелевый контрацептив, вагинальный лубрикант), подвергались испытаниям на влияние на функциональные характеристики теста careHPV Test. Ложноположительные результаты наблюдались при наличии противогрибкового крема, но при анализе с другими веществами в любой концентрации ложноположительных результатов не наблюдалось.

Принцип действия

В тесте careHPV Test применяется такая же технология гибридного захвата 2 (HC2), как и в тесте QIAGEN digene HC2 на ДНК ВПЧ высокого риска (тест HC2). Тест careHPV Test выявляет наличие 14 типов ВПЧ высокого риска 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68 с помощью полногеномных зондов, комплементарных к ДНК ВПЧ, специфических антител, усиления сигнала и определения хемилюминесценции. Тест careHPV Test применяется совместно с тест-системой careHPV для проведения анализа на ДНК ВПЧ высокого риска в образцах из шейки матки и влагалища, собранных с помощью щетки careBrush и среды для сбора careHPV.

Ход процедуры

Тест careHPV Test и тест-система careHPV определяют наличие ДНК 14 типов ВПЧ высокого риска, с использованием полногеномных зондов РНК, комплементарных к ДНК ВПЧ, выявления специфических антител и хемолюминесценции. Целевая ДНК связывается со специфическими зондами РНК с формированием гибридных комплексов РНК-ДНК. Затем гибридные комплексы РНК-ДНК захватываются твердой фазой, покрытой универсальными антителами захвата, специфичными к гибридным комплексам РНК-ДНК. Матрикс образца смывается с захваченных гибридных комплексов для удаления ингибиторов. При усилении сигнала захваченные гибридные комплексы РНК-ДНК выявляются многочисленными антителами, связанными с щелочной фосфатазой. Сигнал, формирующийся в результате хемолюминесцентной реакции, считывается люминометром теста careHPV Test. Результаты автоматически интерпретируются тест-системой careHPV и отображаются графически на контрольном экране теста careHPV.

Способы применения

Использование теста careHPV Test показано в качестве первичного скринингового теста у женщин в возрасте 30 лет и старше для выявления инфекции ВПЧ высокого риска. Тест позволяет выявлять следующие типы ВПЧ высокого риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68. Инфекция ВПЧ высокого риска является фактором риска развития интраэпителиальной неоплазии шейки матки высокой степени (CIN 2/3+). Забор образцов для анализа из шейки матки могут производить врачи или обученные медицинские сотрудники. Образцы из влагалища могут быть собраны самостоятельно под руководством медицинского работника. Тест careHPV Test является экономичным средством первичного скрининга на рак шейки матки в развивающихся странах. Пробная панель careHPV используется для демонстрации работы и технического обслуживания тест-системы careHPV, проведения подробного обзора процедуры анализа careHPV, пошаговой демонстрации проведения анализа careHPV и проведения валидации результата анализа у обследуемого пациента.